jueves, 24 mayo del 2018


Gallibacterium Anatis: Un patógeno aviar importante

Gallibacterium Anatis: Un patógeno aviar importante
Enero 16/2015
Lima - Perú
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Definición

Gallibacterium anatis, microorganismo relativamente "nuevo", es un cocobacilo, gram negativo, inmóvil, encapsulado, no esporulado, pleomórfico, mesófilo y anaerobio facultativo o microaerófilo, el cual crece satisfactoriamente en agar sangre de ovino al 5 por ciento, pero no en otros medios de cultivo comunes o simples, y reduce los nitratos a nitritos (Christensen et al., 2003; Bojesen et al., 2004; Bisgaard et al., 2005; Bojesen et al., 2007; Koga et al., 2007; Garcia et al., 2005; Kristensen et al., 2010; Zepeda et al., 2009; Bojesen et al., 2011; Mendoza et al., 2014).

Historia

El género Gallibacterium, comprende una sola especie, G. anatis y dos genomospecies. Representa a bacterias previamente reportadas como Actinobacillus salpingitidis, Pasteurella haemolytica aviar y P. anatis. Kjos-Hanssen (1950) publicó el primer trabajo sobre esta bacteria, que probablemente representa el organismo posteriormente nombrado como Gallibacterium; él aisló Pasteurella hemolítica causante de una peritonitis y salpingitis. Desde entonces, varios autores han publicado trabajos sobre lo que presumiblemente es Gallibacterium, pero con otros nombres (Christensen et al., 2003; Bojesen et al., 2003; Bisgaard et al., 2005).

En 1982, Bisgaard descubrió la existencia de un grupo taxonómico, denominado Gallibacterium con características fenotípicas comunes a cepas clasificadas como A. salpingitidis y P. haemolytica aviar. En esta etapa, la caracterización se realizó utilizando métodos fenotípicos, que no permitieron establecer una relación filogenética. Sin embargo, después del análisis de hibridación ADN-ADN de cepas de A. salpingitidis y P. haemolytica aviar, evidenciaron un génerocomún confirmándose con el análisis de secuencias del ARNr 16 S, que P. anatis y A. salpingitidis formaban un género (Christensen et al., 2003; Bojesen et al., 2003; Bisgaard et al., 2005).

Distribución del microorganismo en el mundo

Cepas de Gallibacterium se han reportado en países de Europa, África, Asia y América. En la mayoría de los casos, esta bacteria fue aislada de aves comerciales; sin embargo, también se ha reportado su presencia en aves domésticas y silvestres, tales como pavos, gansos, patos, faisanes, perdices, garzas, etc. (Christensen et al., 2003; Bojesen et al., 2003; Bisgaard et al., 2005).

Taxonomia

G. anatis pertenece al orden Pasteurellales, familia Pasteurellaceae y género Gallibacterium. La familia Pasteurellaceae es muy heterogénea, presenta controversia en cuanto a su clasificación taxonómica.

Actualmente, la familia Pasteurellaceae comprende 13 géneros según la “Formerly List of Bacterial names with Standing in Nomenclature”, éstos son: Actinobacillus, Aggregatibacter, Avibacterium, Bibersteinia, Gallibacterium, Haemophilus, Histophilus, Lonepinella, Mannheimia, Nicoletella, Pasteurella, Phocoenobacter y Volucribacter (Christensen et al., 2003; Bojesen et al., 2003; Bisgaard et al., 2005).

Importancia

Gallibacterium anatis es un patógeno primario importante, debido a que puede provocar una infección sistémica en las aves; además causa serios daños en la ganancia de peso y en producción de huevos.

Por otro lado, también puede estar presente en combinación con otros microorganismos, situación que puede complicar aún más el estado sanitario de las aves; y por ende, de su control (Christensen et al., 2003; Bojesen et al., 2004; Bisgaard et al., 2005; Bojesen et al., 2007; Koga et al., 2007; Garcia et al., 2005; Kristensen et al., 2010; Zepeda et al., 2009; Bojesen et al., 2011; Mendoza et al., 2014).

Cuadro clínico

Los animales afectados presentan cara hinchada, secreción nasal, fiebre, depresión, postración, anorexia, dificultad respiratoria, crestas y barbillas cianóticas, diarrea verde café, deshidratación, disminución en la postura (gallinas) y mortalidad variable. A la necropsia, se observa congestión en senos infraorbitarios y tráquea, hepatomegalia con puntos hemorrágicos, esplenomegalia, aerosaculitis, peritonitis y en otros casos, hemorragia en miocardio, inflamación renal, folículos deformes (gallinas), salpingitis, atrofia ovárica, ruptura folicular (Fig. 1) (Christensen et al., 2003; Bojesen et al., 2004; Bisgaard et al., 2005; Bojesen et al., 2007; Koga et al., 2007; Garcia et al., 2005; Kristensen et al., 2010; Zepeda et al., 2009; Bojesen et al., 2011; Mendoza et al., 2014).

Diagnóstico

Se puede realizar a través del aislamiento microbiológico del agente en agar sangre (donde produce hemólisis), además de su identificación y confirmación mediante pruebas de oxidasa, catalasa, indol, ureasa y pruebas bioquímicas con varios carbohidratos. Luego de su identificación, se debe realizar el antibiograma para conocer la susceptibilidad de la bacteria. Para determinar el biovar de Gallibacterium anatis implicado, se tienen que realizar pruebas bioquímicas con diferentes azúcares utilizando los carbohidratos arabinosa, xilosa, inositol, sorbitol, maltosa, trehalosa y dextrina, descritos por Christensen y col en el 2003, el cual describe 24 tipos de biovares. De acuerdo a los resultados que se obtengan con la fermentación de los azúcares, podremos conocer que biovar tenemos presente.

Además de las pruebas microbiológicas tradicionales, existen pruebas serológicas y moleculares que pueden dar una confirmación mucho más rápida, con primers diseñados a partir de la secuencia de los genes ribosómicos 16S y 23S de Gallibacterium, descritos por Bojesen y col 2007 (Fig 2).

Trabajos de investigación realizados en Bioservice

Debido al incremento de casos clínicos en donde además de aislar a las bacterias "clásicas", se hallaba un tipo de crecimiento diferente, se ha estado trabajando con este microorganismo desde el año 2007 y hemos aislado más de 100 cepas de pollos de carne, gallinas ponedoras, reproductoras y en menor proporción, en gallos de pelea con diverso potencial patógeno; la mayoría procedente de Lima, La Libertad, Ica, Madre de Dios, Arequipa y Ucayali. G. anatis se logró aislar de diversos órganos como senos infraorbitarios, tráquea, pulmones, sacos aéreos, hígado y ovario. El 80 por ciento de las cepas de G. anatis mostró hemólisis débil y el 20 por ciento hemólisis intensa, asociada con diseminación a varios órganos, demostrando el gran carácter invasivo de las cepas (Mendoza et al., 2014).

De las pruebas bioquímicas realizadas con las cepas aisladas, el 46 por ciento de ellas resultaron del biovar 4. Cabe resaltar que algunas cepas fermentaron todos los azúcares, constituyendo un biovar nuevo denominado NI.

En cuanto a la sensibilidad del microorganismo al ser enfrentado con antibióticos, entre el 43 y 51 por ciento de cepas fueron sensibles a Florfenicol, Fosfomicina y Amoxicilina. Entre el 80 y 98 por ciento fue resistente a Ciprofloxacina, Enrofloxacina, Doxiciclina, Norfloxacina, Espectinomicina y Sulfatrimetroprin.

Es preocupante observar la disminución de la susceptibilidad antimicrobiana a este microorganismo, debido al probable uso inadecuado de los antimicrobianos, constituyendo un serio problema en su control (Mendoza et al., 2014; Bojesen et al., 2011).

Prevención y control

Para este caso es importante la elaboración de programas efectivos de sanidad aviar, en los cuales se consideren cepas endémicas de los principales departamentos de producción avícola del Perú.

Conclusión

Debemos considerar a este microorganismo dentro de los análisis microbiológicos, ya que si no lo hacemos, esta bacteria puede ir provocando en forma silenciosa problemas crecientes en la crianza de las aves. Una vez aislada, no debemos hacer mal uso de los antibióticos (subdosificación o sobredosificación sin previo examen de sensibilidad), ya que al aumentar la resistencia bacteriana, podríamos desencadenar que la bacteria genere variabilidad genética haciéndola más patógena y por ende, más difícil de controlar.

Referencia bibliográfica

1. Bojesen A, Nielsen O, Christensen J, Bisgaard M. In vivo studies of Gallibacterium anatis. Avian Pathology 2004; 33(2): 145-52.

2. Bisgaard M, Christensen H, Bojesen AM, Christensen JP. Avian infections by species of Pasteurellaceae, an Update. Avian Diseases 2005; 49: 534-9.

3. Bojesen AM, Torpdahl M, Christensen H, Olsen JE, Bisgaard M. Genetic diversity of Gallibacterium anatis isolates from different chickens flocks. Journal of Clinical Microbiology 2003; 41(6): 2737-40.

4. Bojesen A, Christensen H, Nielsen O, Olsen J, Bisgaard M. Detection of Gallibacterium spp. in chickens by fluorescent 16S rRNA In situ hybridization. Journal of Clinical Microbiology 2003; 41(11): 5167-72.

5. Bojesen AM, Nielsen SS, Bisgaard M. Prevalence and transmission of haemolytic Gallibacterium species in chicken production systems with different biosecurity levels. Avian Pathology 2003; 32(5): 503-10.

6. Bojesen AM, Vásquez ME, Robles F, Gonzales C, Soriano EV, Olsen JE, Christensen H. Specific identification of Gallibacterium by PCR using primers targeting the 16S rRNA and 23S rRNA genes. Veterinary Microbiology 2007; 123(1-3): 262-8.

7. Bojesen AM, Vasquez ME, Bager RJ. Antimicrobial Susceptibility and tetracycline resistance determinant genotyping of Gallibacterium anatis. Veterinary Microbiology 2011; 148: 105-110.

8. Christensen H, Bisgaard M, Bojesen A, Mutters R, Elmerdahl J. Genetic relationships among avian isolates classified as Pasteurella haemolytica, “Actinobacillus salpingitidis” or Pasteurella anatis with proposal of Gallibacterium anatis gen. nov., comb. nov. and description of additional genomospecies within Gallibacterium gen. nov. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology 2003; 53: 275-87.

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10. Koga Y, Zavaleta AI, Jimenez KL, Villacorta K. Identificación de cepas de Gallibacterium anatis aisladas en el Perú. En: 10th General Meeting, Canada: American Society for Microbiology; 2007. p. 732

11. Kristensen BM, Frees D, Bojesen A. GtxA from Gallibacterium anatis, a cytolytic RTX-toxin with a novel domain organization. Veterinary Res. 2010; 41(3): 25.

12. Mendoza AK, Zavaleta AI, Koga YY, Rodriguez BJ, Alvarado SA, Tinoco RR. Variabilidad genética de cepas de Gallibacterium anatis aisladas de aves comerciales del Perú con infecciones respiratorias. Rev Int Vet Perú 2014; 25(2): 233-244

13. Zepeda A, Ramirez S, Vega V, Morales V. Hemagglutinating activity of Gallibacterium Strains. Avian Diseases 2009; 53(1): 115-8.

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